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MTT法细胞增殖曲线测定方法

时间:2017-05-05    点击: 次    来源:网络    作者:佚名 - 小 + 大

Day1:

Seed cellsonto a 96-well plate(96 wells plate, 1x104 cells per well)

Day2:

Spin downcells(1000rpm, 5min), Aspirate all medium with a Pasteur pipet(with a 10µl “tip”in the front)

Rinse withnew medium(100 µl/well) by pipette

discardmedium by suction

add 100 µl(medium + MTT) sol. to each well

(*preparing:【10mlmedium + 1ml MTT】/plate)

  5 mg MTT in 1 ml PBS

back toincubator no more than 4 hr.

spin downcells(1000rpm, 5min), discard sup.

add 100 µl (isopropanol(异丙醇) + HCl)

          670µl 12NHCl in 200ml isopropanol(final-0.04N HCl)

or add 100µlDMSO

stand for2hr.

MTT测量波长 570nm。measure O.D.value(570nm)

 

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